千文網(wǎng)小編為你整理了多篇相關的《PCR學習心得(優(yōu)秀范文六篇)》，但愿對你工作學習有幫助，當然你在千文網(wǎng)還可以找到更多《PCR學習心得(優(yōu)秀范文六篇)》。
第一篇：實習學習心得
作為一名即將奔赴教師崗位的大學生，學習科學發(fā)展觀，更要結合自身實際情況，要認真貫徹執(zhí)行胡同志提出的：發(fā)展要有新思路，改革要有新突破，開放要有新局面，各項工作要有新舉措，頂崗實習教師科學發(fā)展觀學習心得。我們要把學習踐行科學發(fā)展觀與執(zhí)教工作結合起來；與謀劃好今后與學生交往結合起來；著力提升我們的教師職業(yè)道德水平和專業(yè)素質。實踐已經充分證明，當代教育需要新的理念新的方式，教學改革的口號也越喊越響亮，這就更需要我們這些即將從事教師職業(yè)的頂崗實習生充分利用好實習這個鍛煉的機會，以新的理念新的方式來組織教學，提高自己的教學能力，同時鍛煉自己管理學生的實踐能力，心得體會《頂崗實習教師科學發(fā)展觀學習心得》。
通過近期的學習，我對科學發(fā)展觀理論有了進一步的理解，我明白了科學發(fā)展觀無處不在，無處不可以應用。從人類個人、國家，乃至整個世界；從經濟、政治到環(huán)境保護等等。我們應該從現(xiàn)在起就將科學發(fā)展觀應用于我們實習
教師的學習、生活、思想、工作上，在實習工作中以科學的理念來完善自己的各項能力。我更加深刻感受到這次學習實踐活動的意義，明白更多認識問題、解決事情的方法，凡事要全面地協(xié)調地去看待問題。
第二篇：實習學習心得
第一天，進入焊接實驗室之前，老師簡要地給我們講解了一下實訓的要求，讓我們對收音機有一個大概的了解，在進行實訓的時候心中更加有數(shù)。
在實訓前，老師給我們發(fā)下了中夏S66E六管超外差式收音機實驗套件。接下來幾天我們的工作就是將這套套件安裝成一個合格的收音機了。我們每個人拆開套件之后對照元件清單仔細檢查了各個元件有無缺失，損壞。
在進行焊接元件之前，我們用廢棄的電路摸板練習，掌握烙筆的用法。剛剛開始自己練習的時候，我們的焊點可謂“抽不忍賭”，有的同學甚至在焊接的時候會出現(xiàn)手顫抖的現(xiàn)象。為此我專門上網(wǎng)，找了一些比較適合我的焊接的方法。有了這些方法的指導，進過一天的練習，我可以完成一次較好的焊接，避免虛焊的同時提高了焊接的速度和準度，并且焊接出來的焊點也比較好看。
在經過兩天的焊接以后，我開始仔細研究了這臺收音機電原理圖和印刷電路板。在多次熟悉焊接工藝要求
在老師的指導下，我們認真完成了收音機。反復檢查后，我們滿懷期待地裝上了電池進行調試。小心翼翼的調試后，收音機里發(fā)出了清晰的音樂聲!我們成功了!我們心里充滿了喜悅和成就感。
通過這次實習，我得到了很大的收獲，這些都是平時在課堂理論學習中無法學到的，我主要的收獲有以下幾點：
1.實習過程中不應該只在意焊接后功能是不是合格，工藝上更加應該高要求;為此我上網(wǎng)找了一些焊接方法：a、右手持電烙鐵。根據(jù)情況左手持焊錫絲或者用尖嘴鉗或鑷子夾持無件或導線。焊接前，電烙鐵要充分預熱。烙鐵頭刃面L要吃錫，即帶一定量焊錫。b、將烙鐵頭刃面緊貼在焊點處。電烙鐵與水平面大約成45～60“角左右。左手向下送錫，右手送烙鐵。送錫時間決定錫量大小，烙鐵停留時間決定加熱時間。當焊錫、烙鐵頭在無件引腳根部焊盤處相接觸后，烙鐵頭在焊點處停留的時間應根據(jù)焊盤大小拄制在0.5～2秒鐘。c、抬開烙鐵頭。侍焊點處的錫冷卻凝固。
2.掌握了幾種基本的電工工具的使用，了解了電路安裝中走線、元件布局等基本常識;
3.本次實培養(yǎng)了我們的動手實踐能力和細心嚴謹?shù)淖黠L。
4.成裝：板焊好后，在電位器和雙聯(lián)上安上撥輪，用四條電線連上喇叭、正極片與彈簧。并將正極片、彈簧分別插入機殼。要求：四條電線的長度要合適，尤其是每條電線兩頭露出的銅絲不要太長(露出3mm為宜)，以防與其它地方短路。
5.直流測量：線路板上留有4個測電流的口，用萬用表，分別在這4個口處測量三極管的靜態(tài)工作電流：IC1=0.5MA左右，IC2=1.5MA，IC4=3MA，IC5.6=6MA。測量合適后要用焊錫將電流口封住，這時收音機就響了。如果遇到哪一級電流太小或太大要重點檢查該級的二、三極管極性是否裝錯，周圍元件是否裝錯，是否有焊接短路的現(xiàn)象。
這次實習給我們上了一堂很有意義的社會實踐課，在很大程度上提高了我們的綜合素質，使我們的理論知識能融入實踐當中，讓我對所學專業(yè)更有信心。使我們對電子工藝的理論有了初步的系統(tǒng)了解。我們了解到了焊普通元件與電路元件的技巧、印制電路板圖的設計制作與工藝流程、收音機的工作原理與組成元件的作用等。這些知識不僅在課堂上有效，對以后的電子工藝課的學習有很大的指導意義，在日常生活中更是有著現(xiàn)實意義;也對自己的動手能力是個很大的鍛煉。實踐出真知，縱觀古今，所有發(fā)明創(chuàng)造無一不是在實踐中得到檢驗的。沒有足夠的動手能力，就奢談在未來的科研尤其是實驗研究中有所成就。在實習中，我鍛煉了自己動手技巧，提高了自己解決問題的能力。比如做收音機組裝與調試時，好幾個焊盤的間距特別小，稍不留神，就焊在一起了，但是我還是完成了任務。在實習中，我鍛煉了自己動手技巧，提高了自己解決問題的能力。
我很感謝在這次實習過程中幫助過我的老師和同學們。謝謝!
第三篇：PCR技術原理及心得
PCR技術原理與心得體會
PCR產物的電泳檢測時間一般為48h以內,有些最好于當日電泳檢測,大于48h 后帶型不規(guī)則甚致消失。
一.假陰性,不出現(xiàn)擴增條帶
PCR反應的關鍵環(huán)節(jié)有①模板核酸的制備,②引物的質量與特異性,③酶的質量及活性 ④PCR循環(huán)條件。尋找原因亦應針對上述環(huán)節(jié)進行分析研究。
模板:①模板中含有雜蛋白質,②模板中含有Taq酶抑制劑,③模板中蛋白質沒有消化除凈,特別是染色體中的組蛋白,④在提取制備模板時丟失過多,或吸入酚。⑤模板核酸變性不徹底。在酶和引物質量好時,不出現(xiàn)擴增帶,極有可能是標本的消化處理,模板核酸提取過程出了毛病,因而要配制有效而穩(wěn)定的消化處理液,其程序亦應固定不宜隨意更改。
酶失活:需更換新酶,或新舊兩種酶同時使用,以分析是否因酶的活性喪失或不夠而導致假陰性。需注意的是有時忘加Taq酶或溴乙錠。
引物:引物質量、引物的濃度、兩條引物的濃度是否對稱,是PCR失敗或擴增條帶不理想、容易彌散的常見原因。有些批號的引物合成質量有問題,兩條引物一條濃度高,一條濃度低,造成低效率的不對稱擴增,對策為:①選定一個好的引物合成單位。②引物的濃度不僅要看OD值,更要注重引物原液做瓊脂糖凝膠電泳,一定要有引物條帶出現(xiàn),而且兩引物帶的亮度應大體一致,如一條引物有條帶,一條引物無條帶,此時做PCR有可能失敗,應和引物合成單位協(xié)商解決。如一條引物亮度高,一條亮度低,在稀釋引物時要平衡其濃度。③引物應高濃度小量分裝保存,防止多次凍融或長期放冰箱冷藏部分,導致引物變質降解失效。④引物設計不合理,如引物長度不夠,引物之間形成二聚體等。
Mg2+濃度:Mg2+離子濃度對PCR擴增效率影響很大,濃度過高可降低PCR擴增的特異性,濃度過低則影響PCR擴增產量甚至使PCR擴增失敗而不出擴增條帶。
反應體積的改變:通常進行PCR擴增采用的體積為20ul、30ul、50ul?；?00ul,應用多大體積進行PCR擴增,是根據(jù)科研和臨床檢測不同目的而設定,在做小體積如20ul后,再做大體積時,一定要模索條件,否則容易失敗。
物理原因:變性對PCR擴增來說相當重要,如變性溫度低,變性時間短,極有可能出現(xiàn)假陰性;退火溫度過低,可致非特異性擴增而降低特異性擴增效率退火溫度過高影響引物與模板的結合而降低PCR擴增效率。有時還有必要用標準的溫度計,檢測一下擴增儀或水溶鍋內的變性、退火和延伸溫度,這也是PCR失敗的原因之一。
靶序列變異:如靶序列發(fā)生突變或缺失,影響引物與模板特異性結合,或因靶序列某段缺失使引物與模板失去互補序列,其PCR擴增是不會成功的。
二.假陽性,出現(xiàn)非特異性擴增帶 1.假陽性
出現(xiàn)的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行PCR 擴增時,擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現(xiàn)假陽性。需重新設計引物。
靶序列或擴增產物的交叉污染:這種污染有兩種原因:一是整個基因組或大片段的交叉污染,導致假陽性。這種假陽性可用以下方法解決:①操作時應小心輕柔,防止將靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外。②除酶及不能耐高溫的物質外,所有試劑或器材均應高壓消毒。所用離心管及樣進槍頭等均應一次性使用。③必要時,在加標本前,反應管和試劑用紫外線照射,以破壞存在的核酸。二是空氣中的小片
段核酸污染,這些小片段比靶序列短,但有一定的同源性?？苫ハ嗥唇?與引物互補后,可擴增出PCR產物,而導致假陽性的產生,可用巢式PCR方法來減輕或消除。
2.出現(xiàn)非特異性擴增帶
PCR擴增后出現(xiàn)的條帶與預計的大小不一致,或大或小,或者同時出現(xiàn)特異性擴增帶與非特異性擴增帶。非特異性條帶的出現(xiàn),其原因:一是引物與靶序列不完全互補、或引物聚合形成二聚體。二是Mg2+離子濃度過高、退火溫度過低,及PCR 循環(huán)次數(shù)過多有關。其次是酶的質和量,往往一些來源的酶易出現(xiàn)非特異條帶而另一來源的酶則不出現(xiàn),酶量過多有時也會出現(xiàn)非特異性擴增。其對策有:①必要時重新設計引物。②減低酶量或調換另一來源的酶。③降低引物量,適當增加模板量,減少循環(huán)次數(shù)。④適當提高退火溫度或采用二溫度點法(93℃變性,65℃左右退火與延伸。
3.出現(xiàn)片狀拖帶或涂抹帶
PCR擴增有時出現(xiàn)涂抹帶或片狀帶或地毯樣帶。其原因往往由于酶量過多或酶的質量差,dNTP濃度過高,Mg2+濃度過高,退火溫度過低,循環(huán)次數(shù)過多引起。其對策有:①減少酶量,或調換另一來源的酶。②減少dNTP的濃度。③適當降低Mg2+濃度。④增加模板量,減少循環(huán)次數(shù)。
三.PCR污染與對策
PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛 的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產生。污染原因
(一標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染。
(二PCR試劑的污染:主要是由于在PCR試劑配制過程中,由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染.(三PCR擴增產物污染:這是PCR反應中最主要最常見的污染問題,因為PCR產物拷貝量 大(一般為1013拷貝/ml,遠遠高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的PCR產物 污染,就可造成假陽就可形成假陽性。
還有一種容易忽視,最可能造成PCR產物污染的形式是氣溶膠污染;在空氣與液體面摩擦時就可形成氣溶膠,在操作時比較劇烈地搖動反應管,開蓋時、吸樣時及污染進樣槍的反復吸樣都可形成氣溶膠而污染.據(jù)計算一個氣溶膠顆?？珊?8000拷貝,因而由 其造成的污染是一個值得特別重視的問題.(四實驗室中克隆質粒的污染:在分子生物學實驗室及某些用克隆質粒做陽性對照的檢驗室,這個問題也比較常見。因為克隆質粒在單位容積內含量相當高,另外在純化過程中需用較多的用具及試劑,而且在活細胞內的質粒,由于活細胞的生長繁殖的簡便性及具有很強的生命力,其污染可能性也很大。污染的監(jiān)測
一個好的實驗室,要時刻注意污染的監(jiān)測,考慮有無污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。
四.對照試驗
1.陽性對照:在建立PCR反應實驗室及一般的檢驗單位都應設有PCR陽性對照,它是PCR反應是否成功、產物條帶位置及大小是否合乎理論要求的一個重要的參考標志。陽性對照要選擇擴增度中等、重復性好,經各種鑒定是該產物的標本,如以重組質粒為陽性對照,其含量宜低不宜高(100個拷貝以下,但陽性對照尤其是重組質粒及高濃度陽性標本,其對檢測或擴增樣品污染的可能性很大。因而當某一PCR試劑經自己使用穩(wěn)定,檢驗人員心中有數(shù)時,在以后的實驗中可免設陽性對照。
2.陰性對照:每次PCR實驗務必做陰性對照。它包括①標本對照:被檢的標本是血清就用鑒定后的正常血清作對照;被檢的標本是組織細胞就用相應的組織細胞作對照。②試劑對照:在PCR試劑中不加模板DNA或RNA,進行PCR擴增,以監(jiān)測試劑是否污染。
3.重復性試驗
4.選擇不同區(qū)域的引物進行PCR擴增 五.防止污染的方法
(一合理分隔實驗室:將樣品的處理、配制PCR反應液、PCR循環(huán)擴增及PCR產物的鑒定等步驟分區(qū)或分室進行,特別注意樣本處理及PCR產物的鑒定應與其它步驟嚴格分開。最好能劃分①標本處理區(qū);②PCR反應液制備區(qū);③PCR循環(huán)擴增區(qū);④PCR產物鑒定區(qū)。其實驗用品及吸樣槍應專用,實驗前應將實驗室用紫外線消毒以破壞殘留的DNA或RNA。
(二吸樣槍:吸樣槍污染是一個值得注意的問題。由于操作時不慎將樣品或模板核酸吸入槍內或粘上槍頭是一個嚴重的污染源,因而加樣或吸取模板
核酸時要十分小心，吸樣要慢，吸樣時盡量一次性完成，忌多次抽吸，以免 交叉污染或產生氣溶膠污染。(三預混和分裝 PCR 試劑:所有的 PCR 試劑都應小量分裝，如有可能，PCR 反應液應預先配制好，然后小量分裝，-20℃保存。以減少重復加樣次數(shù)，避免污染機會。另外，PCR 試劑，PCR 反應液應與樣品及 PCR 產物分開保存，不應放于同一冰盒或同一冰箱。(四防止操作人員污染，使用一次性手套、吸頭、小離心管應一次性使 用。(五設立適當?shù)年栃詫φ蘸完幮詫φ?，陽性對照以能出現(xiàn)擴增條帶的最 低量的標準病原體核酸為宜，并注意交叉污染的可能性，每次反應都應有一 管不加模板的試劑對照及相應不含有被擴增核酸的樣品作陰性對照。(六減少 PCR 循環(huán)次數(shù)，只要 PCR 產物達到檢測水平就適可而止。(七選擇質量好的 Eppendorf 管，以避免樣本外溢及外來核酸的進入，打開離心管前應先離心，將管壁及管蓋上的液體甩至管底部。開管動作要輕，以防管內液體濺出。呵呵 其實 DNA（或 RNA）的提取方法及 DNA 的質量也很關鍵 例如：SDS 法和 CTAB 法提取的 DNA 與 RNA 的 PCR 結果有很大的差異的。呵呵。
第四篇：實習學習心得
來到容閎已經快有一個星期了，美麗的校園，彬彬有禮的學生，人與人之間和諧的關系，都讓我看到了容閎學校的特別之處，直到我深入教學第一線才發(fā)現(xiàn)了容閎學校教學的獨到之處，為什么連續(xù)三年位于珠海市中考第一的原因。
我的指導老師是初中文科組的組長，饒幫軍老師。他為人很熱情，對語文教學也有自己獨到的看法。
我實習的班是初三，第一次與他們見面完全沒有拘束的感覺，課堂氣氛很好，學生也很友善，容閎學校的班級實行的是分組教學，將分組到底，上課分組，班會也是分組，這樣的好處可以充分發(fā)揮孩子們的創(chuàng)造力，并且一個小組只有8個人，每個人都在團隊承擔任務，這樣有利于每個孩子的發(fā)展。
說一說今天的語文課吧，連著兩節(jié)都是語文課，讓我見識到了真正的自主學習。第一節(jié)饒老師布置任務，學生準備分組講解課文，一組一首詞，背誦，第二節(jié)課展示，每組只有8分鐘的時間展示，饒老師點評。
第一節(jié)課完全是學生自己在看書，背誦，準備講課，饒老師只是進行一些指導，我在想學生自學可以搞定這些內容嗎?
第二節(jié)課，講課的結果讓我大吃一驚。效果很好，學生講課的質量很高，很有效率，并且在很短的時間內把詩詞都背了下來，真是讓人佩服不已。
分組教學+自主學習=成功?
第五篇：PCR實驗室
高端PCR實驗室控制設計說明
PCR實驗室即分子生物學實驗室，在醫(yī)療、科研、生物技術方面得到廣泛的應用。因其在不同行業(yè)的應用各有區(qū)別，在具體設計時也有不同之處，就醫(yī)療機構的應用而言，主要使用三區(qū)或四區(qū)設計，即試劑準備區(qū)、樣品提取區(qū)、擴增分析區(qū)；此類三區(qū)設計時候應用于類似熒光定量型或同類PCR分析設備，及擴增與分析過程在設備內一次完成。而四區(qū)設計在三區(qū)的基礎上講擴增分析區(qū)拆分為擴增區(qū)與分析區(qū)適用于其他類型的pcr設備及手工處理。
在PCR實驗的設計上，經過多年的經驗累積，已經在一些關鍵技術上達成了共識。因為PCR實驗中所產生的DNA與RNA片段過于微小，以至于可以穿透高效過濾器，所以在實驗室設計上已經不在強制要求設計高效凈化系統(tǒng)，但是為了提高實驗環(huán)境水平及保護實驗室內的敖貴設備方面，如果在具備條件的情況下可考慮追加高效空氣凈化系統(tǒng)；建議凈化級別萬級。在PCR實驗中所產生的DNA與RNA片段污染是一直以來PCR實驗的重點問題。此類污染主要至上次試驗中所產生的基因片段對下次試驗產生的污染，而且一旦試驗環(huán)境中的污染形成后很難處理。因為消毒等傳統(tǒng)方式對于基因污染沒有很良好的效果。所以在PCR實驗室設計中一般將整套實驗室設計為全新風型實驗室，這樣而已通過有效的換氣次數(shù)來達到凈化室內污染的作用。而在控制方面也有很多不同之處，因為各單位對PCR實驗的重視程度各有不同，所以在設計上也有不同，主要的控制設計有定送定排式壓力控制系統(tǒng)、變送定排式壓力控制系統(tǒng)變送變排式壓力控制系統(tǒng)。在控制設備方面也有很多區(qū)分如壓力無關型控制系統(tǒng)、壓力有關型控制系統(tǒng)。
根據(jù)業(yè)主要求，本PCR實驗室為三區(qū)設計，各區(qū)可獨立使用，不設置高效過濾系統(tǒng)等相關要求，根據(jù)業(yè)主以上要求，我方給出的設計方案為壓力無關型變送變排壓力控制系統(tǒng)。本系統(tǒng)的特點是，設備啟動后可根據(jù)實驗室內使用節(jié)點調節(jié)送風量及排風量來控制各房間狀態(tài)，系統(tǒng)說明見下圖
? 每個房間可分別控制，使用時通過房間開關輸出啟動信號，當設備接到啟動信號時設備運行，運行中根據(jù)管道壓力反饋決定變頻器大小，房間內送排風量由壓力無關型風量調節(jié)閥控制。? 當有多個房間開啟或關閉時，設備更加管道壓力反饋，調節(jié)設備變頻器增加或減少送排風量來穩(wěn)定管道壓力。各房間內壓力又房間內的壓力無關型定風量閥進行控制。
? 當BSC（生物安全柜，B2全排）開啟時BSC專用供風機組運行，BSC-供風機-排風機連鎖運轉。
? 當BSC做變風量調節(jié)時，根據(jù)房間內壓力變化，BSC專用供風機組前安裝的壓力無關型變風量調節(jié)閥根據(jù)壓力變化增減送風量，確保房間壓力執(zhí)行在可控范圍內。
? 當房間不適用時，房間與緩沖間均關閉電動密閉閥，確保房間處在密閉狀態(tài)避免布朗運動造成的可能污染風險。
? 房間換氣次數(shù)均按照一定凈化標準設計，當室內污染發(fā)生時，通過一定時間的換氣處理后，污染問題可以基本解決。? 本系統(tǒng)如果業(yè)主需要，可在室內送風口末端加裝高效過濾設備，房間可升級為凈化型實驗室。
? 壓力無關型風閥簡介：壓力無關型風閥的特點是不會根據(jù)管道壓力的變化而影響風閥內部的送風量，在一定管道壓力區(qū)間內能夠自行調節(jié)閥體阻力，來穩(wěn)定送風量，是高端實驗室必備的關鍵部件，目前此類閥體技術均有國外生產廠家控制，目前國內主用使用的產品有妥思、文丘里、西門子等品牌。
第六篇：實習學習心得
昨日只輸入了兩個費用科目的數(shù)據(jù)，今日要輸?shù)氖枪芾碣M用，管理費用下比較通用的科目有：辦公費，業(yè)務招待費，水電費，差旅交通費，固定資產折舊，地方稅費（如堤圍費，防洪費等），其他管理費用，管理人員工資，福利費，工會經費，職工教育經費，勞動保險費，住房公積金，資產減值準備等。這些科目海峽基本都有，我們就把？按順序編好明細輸進去就好了，還好海峽的會計做賬都很清楚所以我們在輸完數(shù)據(jù)對賬的時候就很簡便了，因為每個數(shù)據(jù)都是對的話就不用我們去對總賬，明細賬，有的時候如果還是不對的話還要去翻看記賬憑證，那樣的話工作量就是很大的了，這都是小慧和我說的，我在想看來稅審并沒有我看到的這么簡單，每個企業(yè)的會計的做賬方法都是不一樣的，有的還是手工賬，看來我要應對的還有很多不一樣的考驗啊，期待中。這樣的話三個費用就輸完了，也就是說損益表上的科目是輸完了，這有先把這個基本的工作做完了才能繼續(xù)做后面的鑒證表的輸入工作。
